Q:这种直接PCR试剂盒，扩增产物可以做哪些实验

A:PCR的产物可以通过琼脂糖凝胶电泳和EB染色进行分析，进行下游的常规操作，例如限制性酶切、DNA测序、dHPLC分析等

Q:可以应用于哪些领域

A:1、人类、其他哺乳动物和鸟类基因分析；

   2、可用于常规检测：限制性酶切、琼脂糖凝胶电泳/EB染色、荧光毛细管电泳、DNA测序或dHPLC分析

Q:适用样品

A:新鲜或冻存的组织、细胞、病毒等样品（保存良好的石蜡包埋样品）

Q:样品准备

A:1、组织或细胞一般不需要处理，取103-105左右的样品直接PCR；

   2、石蜡包埋的样品，建议加入5-10倍体积的预处理液中，55℃孵育过夜后，煮沸2-5min，取1-2.5ul样品进行PCR（2-5%总反应体积）；剩余样品保存在-20℃

Q:反应体系

A:以20ul体系示例（20-50ul/reaction），在微量离心管中加入以下各种成分

Q:PCR反应参数设置

A:依据扩增产物而定，以2kb的扩增产物为例：94℃ 4 min，35 cycles（94℃ 30 sec，55℃ 30 sec，72℃ 1 min），72℃ 5 min，4℃保温。

Q:我的片段大小＜1kb

A:扩增1kb以下片段，30 sec延伸即可；也可采用两步扩增法（设计引物长度22-25bp，68℃退火延伸）