蛋白表达和纯化实验_上海七海复泰生物科技有限公司

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蛋白表达和纯化实验

表达体系介绍

表达体系	宿主细胞	表达量	特点
原核	E.coli	0.1-100g	· 载体构建简单、表达量高 · 容易形成包涵体、无翻译后修饰
酵母	Pichia Saccharomyces cerevisiae	0.1-100g	· 表达量较高、蛋白可以较好折叠 · 缺少多种翻译后修饰
昆虫	Insect cell-Baculovirus	0.1-10g	· 表达量相对较低、有反应后修饰 · 表达体系相对复杂
哺乳	293 CHO	0.1-10g	· 表达量低 · 翻译后修饰完全、蛋白具有天然活性

流程和周期

流程	内容	详情	周期（工作日）
1	分子克隆，构建表达载体	· 由客户提供基因或者代为克隆基因 · 把基因克隆到相应的表达载体上 · 对基因表达载体测序验证	5-10
2	小规模表达测试	· 验证表达载体可以表达正确的蛋白 · 摸索表达条件	5-10
3	大规模表达、纯化	· 1-50升表达体系 · 纯化蛋白	5-10
4	纯化后蛋白检测	SDS-PAGE、Western Blotting、LC-MS、HPLC、Activity Assay	1-5

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