Q:Mouse anti-Myc Mab-Sepharose作用
A:可以用于带Myc标签的蛋白免疫沉淀、蛋白纯化等
Q:抗体种类
A:单克隆抗体
Q:抗体亚型
A:IgG
Q:来源宿主
A:小鼠(mouse)
Q:免疫原
A:KLH 交联的多肽Myc(EQKLISEEDL)
Q:抗体纯化
A:将腹水经硫酸铵分级沉淀纯化、亲和纯化
Q:纯度
A:>95%
Q:产品形态
A:50%悬浊液,白色
Q:储存溶液
A:PBS,pH 7.4,50% 甘油,0.02% (w/v) 叠氮化钠
Q:应用实验
A:5-15% (V/V)用于IP,或者用于亲和纯化
Q:保存条件
A:2-8℃短期保存;建议分装后-20oC长期保存
Q:细胞裂解
A:加入适量lysis buffer(含蛋白酶抑制剂),裂解细胞。
建议:在lysis buffer 中,加入全能核酸酶(产品货号:RPE002),降解DNA和RNA,可以简化实验、显著提高产物得率和实验的重复性
Q:Myc标签抗体--亲和琼脂糖孵育
A:•用lysis buffer洗涤FLAG--亲和琼脂糖三次;
•加入样品量10%(V/V)左右的亲和琼脂糖,4℃震荡混合,2hr或者过夜;
•洗涤亲和琼脂糖三次;
•洗脱蛋白:用Myc多肽(或者0.1M Gly,pH3)洗脱目标蛋白; 或者加入等体积2X SDS Loading buffer, 沸水浴5min后,离心上清直接用于SDS-PAGE分析或者Western blot检测
Q:再生
A:用0.1M Gly,pH3,洗涤2-3次(快速洗涤,长时间会损坏抗体),再用PBS洗涤。
推荐:对于大量蛋白纯化,建议装1-5mL亲和柱,实验方法和一般亲和柱类似
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