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anti-HA Mab-sepharose

Q:Mouse anti-HA Mab-Sepharose作用

A:可以用于带HA标签的蛋白免疫沉淀、蛋白纯化等


Q:抗体种类

A:单克隆抗体


Q:抗体亚型

A:IgG


Q:来源宿主

A:小鼠(mouse)


Q:免疫原

A:KLH 交联的多肽HA(YPYDVPDYA)


Q:抗体纯化

A:将腹水经硫酸铵分级沉淀纯化、亲和纯化


Q:纯度

A:纯度>95%


Q:产品形态

A:50%悬浊液,白色


Q:储存溶液

A:PBS,pH 7.4,50% 甘油,0.02% (w/v) 叠氮化钠


Q:应用

A:5-15% (V/V)用于IP,或者用于亲和纯化


Q:保存条件

A:2-8℃短期保存;建议分装后-20oC长期保存


Q:细胞如何裂解

A:加入适量lysis buffer(含蛋白酶抑制剂),裂解细胞
在lysis buffer 中,加入全能核酸酶(产品货号:RPE002),降解DNA和RNA,可以简化实验、显著提高产物得率和实验的重复性


Q:HA标签抗体--亲和琼脂糖

A:²用lysis buffer洗涤HA--亲和琼脂糖三次;
   ²加入样品量10%(V/V)左右的亲和琼脂糖,4℃震荡混合,2hr或者过夜;
   ²洗涤亲和琼脂糖三次;
   ²洗脱蛋白:用HA多肽(或者0.1M Gly,pH3)洗脱目标蛋白; 或者加入等体积2X SDS Loading buffer, 沸水浴5min后,离心上清直接用于SDS-PAGE分析或者Western blot检测


Q:再生

A:用0.1M Gly,pH3,洗涤2-3次(快速洗涤,长时间会损坏抗体),再用PBS洗涤。
  推荐:对于大量蛋白纯化,建议装1-5mL亲和柱,实验方法和一般亲和柱类似

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