Q：Anti-FLAG Mab Sepharose作用

A：可以用于带FLAG标签的蛋白免疫沉淀、蛋白纯化等。

Q：抗体种类

A：单克隆抗体

Q：抗体亚型

A：IgG

Q：来源宿主

A：小鼠（mouse）

Q：免疫原

A：KLH 交联的多肽FLAG（DYKDDDDK）

Q：纯度

A：将腹水经硫酸铵分级沉淀纯化、亲和纯化，纯度>95%

Q：载量

A：1mg/mL

Q：产品形态

A：50%悬浊液，白色

Q：储存溶液

A：PBS，pH 7.4，50% 甘油，0.02% (w/v) 叠氮化钠

Q：应用于哪些实验

A：1、可用于带FLAG标签的蛋白免疫沉淀
     2、可用于带FLAG标签的重组蛋白大量纯化 

Q:如何裂解细胞

A:加入适量lysis buffer(含蛋白酶抑制剂)，裂解细胞。
   建议：在lysis buffer 中，加入全能核酸酶 benzonase，降解DNA和RNA，可以简化实验、显著提高产物得率和实验的重复性。

Q:裂解液可以用什么溶液

A:lysis buffer

Q:大肠杆菌-裂解

A:每1L培养的菌液加入10mL裂解液（40mM Tris-HCl，pH8.0，1% CHAPSO），含蛋白酶抑制剂，离心取上清

Q:哺乳动物细胞-裂解

A:先用PBS润洗细胞2次。每个培养皿（约106~107个细胞）加入1mL裂解液（50mM Tris-HCl，150mM NaCl，1%Triton X-10 ，pH7.4），每毫升裂解液可加入10 µL蛋白酶抑制剂混合物，离心取上清

Q:细胞裂解后如何处理

A:用lysis buffer洗涤FLAG--亲和琼脂糖三次

Q:加入多少sepharose beads

A:加入样品量10%（V/V）左右的亲和琼脂糖

Q:加入sepharose后如孵育多久

A:4℃震荡混合，2hr或者过夜

Q:如何洗涤sepharose（用什么洗涤）

A:洗涤亲和琼脂糖三次

Q:如何洗脱蛋白

A:用FLAG肽（或者0.1M Gly,pH3）洗脱目标蛋白

Q:如何再生

A:用0.1M Gly,pH3，洗涤2-3次（快速洗涤，长时间会损坏抗体），再用PBS洗涤。

Q:是否可做纯化

A:适用蛋白纯化实验

Q:如果需大量蛋白纯化，如何实验

A:大量蛋白纯化，建议装1-5mL亲和柱，实验方法和一般亲和柱类似