Q:耐受血液类型
A:耐受25%全血
Q:这种直接PCR试剂盒,扩增产物可以做哪些实验
A:PCR的产物可以通过琼脂糖凝胶电泳和EB染色进行分析,进行下游的常规操作,例如限制性酶切、DNA测序、dHPLC分析等
Q:直接PCR试剂盒适用于哪些领域
A:1、人类、其他哺乳动物和鸟类基因分析;
2、可用于常规检测:限制性酶切、琼脂糖凝胶电泳/EB染色、荧光毛细血管电泳、DNA测序或dHPLC分析;
3、亲自鉴定;
4、SNP分析(限制性酶切);
5、临床样本检验。
Q:哪些样本适用
A:新鲜血液、4℃保存2年以上EDTA康宁的全血、EDTA或肝素抗凝剂血、样品拭棒、Whatman903滤纸等各种血液样品
Q:操作流程、实验步骤等与常规检测方法有多少区别
A:除了无需进行DNA抽提,其他手段兼容。
Q:PCR体系成分
A:分别加入模板、特异性引物、5*buffer、50*dNTP、0.5-1ul聚合酶,最后加入灭菌水至20ul,轻弹混匀;
Q:模板推荐多少拷贝量
A:103-106拷贝
Q:PCR反应参数设置
A:依据扩增产物而定,以2kb的扩增产物为例:94℃ 4min,35 cycles(94℃ 30sec,55℃ 30sec,72℃ 1min),72℃ 5min,4℃ soak。
Q:1kb以下片段,是否一样操作
A:扩增1kb以下片段,30sec延伸即可,也可两步法(引物长度22-25bp,68℃退火延伸)
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