Q:Protein L的结合范围

A:可以结合所有的Ig类（IgG，IgM，IgA，IgE和IgD），也可以结合单链抗体和Fab片段。

Q:适用样本

A:腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体

Q:基质

A:4%交联琼脂糖凝胶

Q:配基

A:重组protein L

Q:配基密度

A:5mg重组蛋白L/ml

Q:动态吸附载量

A:5-10mg人IgG/ml

Q:颗粒大小

A:50-160um

Q:推荐流速

A:50-300cm/h

Q:pH范围

A:2~11

Q:使用温度

A:4°或常温

Q:保存液体

A:20%乙醇

Q:哪些情况下推荐使用Protein L

A:·protein A无法结合的单克隆抗体纯化
   ·轻链为kappa单抗或者多抗血清纯化
   ·用牛血清培养基培养杂交瘤细胞纯化抗体时，避免牛血清中抗体污染（牛血清中主要是lambda链抗体，不结合）

Q:如何平衡

A:用5-10柱体积的平衡缓冲液（20mM PBS,PH7.4）平衡层析柱，至流出液电导和pH与平衡液一致

Q:对于某些载量较少抗体的纯化，如何平衡

A:对于某些载量较少抗体的纯化，可以适当调高平衡缓冲液中的盐浓度（最高达3M）和pH值（最高达8.2），来增强抗体与介质的吸附结合力。但有时过高的PH值会增加杂蛋白的吸附，因此应用时需根据实际情况适当调节。上述的缓冲液在使用前先用0.45um滤膜过滤。

Q:如何上样

A:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配置；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释；如果上样体积过大，可以采取调节上样液PH和盐浓度的方式使样品的PH和电导与平衡液接近。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。

Q:上样后出现堵柱问题

A:为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或0.45um滤膜过滤处理。

Q:如何洗涤

A:上样完毕后继续用平衡缓冲液洗至基线（5-10个柱体积）。

Q:如何洗脱

A:用3-5个柱体积洗脱缓冲液洗脱（0.1M柠檬酸PH2.5；或0.1M甘氨酸PH2.5；具体洗脱条件与抗体的结合强度和稳定性密切相关，效果不好时应进行洗脱缓冲液的优化）收集洗脱液。洗脱后，应立即用碱性缓冲液（如1M Tris-HCl,PH9.0）将收集到的抗体溶液中和到抗体稳定的PH，避免抗体失活。

Q:如何在位清洗

A:介质使用后，需要对介质进行在位清洗。
用50mM NaOH清洗柱子3-5柱体积，并立即用5-10柱体积的纯水冲洗，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。