Q:SUMO蛋白酶识别位点
A:SUMO Protease(SUMO蛋白酶,又称ULP蛋白酶)能够识别并且高效地将SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)从融合蛋白上切割下来。
Q:相比EK和TEV,SUMO蛋白酶的优势
A:相对于EK和TEV等蛋白酶的短小识别位点,SUMO蛋白酶能够识别完整的SUMO序列,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。
Q:sumo蛋白酶如何去除
A:SUMO蛋白酶具有多聚His标签,便于融合蛋白切割后用NI-NTA(产品货号PAN001)去除。
Q:SUMO Protease来源
A:自E.coli表达经亲和纯化的重组蛋白酶。
Q:酶活性单位定义
A:在30℃条件下反应1小时,能够切割5ug的反应底物达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
Q:推荐反应体系
A:
反应物组成 | 体积 |
SUMO融合蛋白 | 100ug |
SUMO Protease | 2ul(10U/ul) |
10*SUMO Protease Buffer | 10ul |
ddH2O | 至100ul |
Q:不同温度下的参考反应时间
A:
1、4℃反应15~16小时 |
2、16℃反应4小时 |
3、25℃反应1.5小时 |
4、30℃反应1小时 |
Q:蛋白酶纯度
A:>95%,as determined by SDS-PAGE
Q:是否耐受2M尿素
A:耐受
Q:酶切效率如何?
A:sumo蛋白酶酶切特异性和酶切效率都很高
Q:sumo蛋白酶能否在细胞裂解液中使用或者在活细胞的状态下使用
A:sumo蛋白酶在蛋白中使用,用于切割标签。裂解液或活细胞的这两种状态都不推荐----杂质太多,影响酶活性
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