Q:来源
A:烟草蚀纹病毒蛋白酶;Tobacco etch virus protease,来源于烟草蚀纹病毒(TEV)Nla的重组蛋白酶,大肠杆菌重组表达。
Q:TEV protease用途
A:可以用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签
Q:识别位点
A:TEV蛋白酶具有很强的位点特异性,能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly),最普通的是ENLYFQG,其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。
Q:如何去除
A:该酶带有His-sumo Tag经6*His标签纯化,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA(产品货号:PAN001)去除。
Q:酶活性单位定义
A:在1*TEV Buffer(50mM Tris-HCL,PH 8.0,0.5mM MEDTA,1mM DTT)中,30℃条件下反应1小时,能够切割3ug的反应底物达85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
Q:溶液组分
A:
TEV protease储存液 | 10*cleavage Buffer |
25mM Tris-HCL,PH8.0 | 500mM Tris-HCL,PH8.0 |
150mM NaCL | 5mM EDTA |
1mM EDTA | 10mM DTT |
Q:推荐反应体系
A:
反应物组成 | 体积 |
融合蛋白 | 50ug |
TEV protease | 2ul(10U/ul) |
10*TEV Buffer | 10ul |
ddH2O | 至100ul |
Q:活性测试
A:待测融合蛋白100ug,加入TEV protease 2ul,4℃反应16小时,取酶切前后样品SDS-PAGE检测,>90%融合蛋白被切割。
Q:酶纯度
A:>90%
追求卓著,不断创新
为您的实验保驾护航
为客户解决一切难题
期待与您携手共进