Q:Prescission Protease可识别哪些序列

A:PP酶特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割，读物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。

Q:切割哪种标签

A:PP酶可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。

Q:酶活性单位定义

A:在5℃条件下反应16小时，能够切割100ug的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。

Q:Prescission Protease储存液成分

A:25mM Tris-HCl，PH 8.0
   150mM NaCl
   1mM EDTA
   5mM DTT
   50%(v/v）Glycerin

Q:10*Cleavage Buffer成分

A:500mM Tris-HCl，PH 7.0
   1.5M NaCl
   10mM EDTA
   10mM DTT

Q:推荐反应体系

A:

Q:参考反应时间

A:4℃反应15-16小时

Q:蛋白纯度

A:＞95%，as determined by SDS-PAGE

Q:储存条件

A:长期储存于-80℃，可保存2年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。10*Cleavage Buffer置于-20℃保存。

Q:PP酶与肠激酶/凝血酶的区别

A:识别位点不一样，反应buffer不一样

Q:酶活、切割效率如何

A:效率都很好。

Q:实验后发现融合蛋白只切了一小部分，大部分未被切除，原因？解决方法

A:适当提高切割反应的温度，时间，适当增加酶量。